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當前位置:首頁產品中心生化試劑盒氮代謝系列硝酸還原酶(NR)(NADH速率法)微量法測試盒

硝酸還原酶(NR)(NADH速率法)微量法測試盒
產品簡介:

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產品型號:

更新時間:2022-03-14

廠商性質:經銷商

訪問量:413

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021-39596320

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產品介紹

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱:硝酸還原酶(NR)NADH速率法)微量法測試盒
規格100/96
測試方法微量法
貨號:GOY-01S6477
分類:氮代謝系列
商品介紹:
NR
EC 1.7.1.3)廣泛存在于植物中,是植物硝態氮轉化為氨態氮的關鍵酶,也是誘導酶,對作物的產量和品質有影響。

測定原理

NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD +H 2 ONADH 340 nm 有最大吸收峰,通過測定NADH減少速率來表示NR活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測定步驟
1
分光光度計預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
2
將試劑一、二、三37(哺乳動物)25(其它物種)預熱10分鐘。
3
加樣表:

圖2.jpg

樣本的前處理
FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4200g離心5min,棄沉淀,取上清在48000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后48000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
3號染色體開放閱讀框25抗體     細胞周期蛋白SG2N抗體

轉錄激活因子MYB抗體     細胞周期蛋白N端結構域蛋白2抗體

原癌基因cMAF抗體     細胞周期蛋白N端結構域蛋白1抗體

19號染色體開放閱讀框46抗體     細胞周期蛋白G相關激酶抗體

8號染色體開放閱讀框70抗體     細胞周期蛋白3抗體
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硝酸還原酶(NR)NADH速率法)微量法測試盒去離子甲酰胺100mL  間充質干細胞脂防細胞分化生長因子5mL

BLOTTO 溶液100mL  間充質干細胞生長因子5mL

酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL  間充質干細胞生長因子 - 無血淸5mL

酵母 tRNA 溶液 B( 精提 )1.5mL  間充質干細胞軟骨細胞分化生長因子5mL

Denhardt 溶液,50×100mL  間充質干細胞成骨細胞分化生長因子5mL
FBP活性計算:
1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應體系總體積,1×10-3 LεNADPH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.1 mLV樣總:加入提取液體積,1mLT:反應時間,5 minCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本質量,g


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